采用6Sigma培训方法对医药环孢素A血药浓度进行监测！

医药环孢素A（CsA）是一种强效免疫抑制剂，为临床拮抗器官和组织移植后排异反应的首选药物。CsA治疗窗较窄，口服吸收不规则、不完全，药动学个体差异及机体对其敏感性和耐受性的差异很大，剂量过大、血药浓度过高时，易产生难以与排异反应相区分的肾毒性；剂量不足、血药浓度过低时会影响疗效，出现排异反应，故检测CsA的血药浓度显得尤为重要。为了保证CsA检测结果的质量，需要建立完善的质量保障体系。卫生部临床检验中心在全国范围内开展CsA的室间质量评价（externalqualityassessment,EQA）工作，同时也对室内质量控制（internalqualitycontrol,IQC）水平进行调查研究。我们将卫生部临床检验中心回馈的EQC结果及本实验室的IQC结果的情况结合6Sigma培训（6σ）理论对其不同的检测方法和仪器的结果进行分析。

卫生部临床检验中心反馈的2018年参加卫生部临床检验中心CsA室间质评项目的所有单位的EQC结果，EQA所用质控品由美国伯乐（Bio-Rad）公司提供的5个批号的血清基质质控品。室内质控品为各临床实验室内部使用的相应配套质控品或者自制质控品，同时将本实验室上报的2018年1月和2月的IQC进行统计。

（1）实验室间CV将3倍标准差（s）之外的检测结果视为离群值抛除后，计算各组的实验室仪器间CV。

（2）σ度量值的估计：对本科室IQC数据进行统计，得到实验室IQC的CV见表1。

采用基于Web方式的EQA软件系统调查2018年参加卫生部临床检验中心CsA的EQA汇报结果，按照检测仪器方法分组，将本实验室检测结果与整体靶值比较，求5个批号质控物的平均偏差作为本实验室仪器方法的偏倚（Bias）估计见图1。利用公式：σ=（TEa-Bias）/CV，结合IQC评价标准（TEa=25%），得到本实验室的σ度量值。σ≥3为实验室的最低水平，σ>6称为一流水平。

（3）及格率实验室80%以上结果在允许范围内为成绩合格。评价标准为靶值±25（取大值）。

（4）偏倚5个批号质控物的平均偏差作为本实验室仪器方法的偏倚（Bias）估计。评价标准<15%。

参加全国CsA调查的221家实验室中有10家实验室未回报检测仪器方法或者选择其他检测方法，对余下的211家实验室按照检测仪器方法分组并进行统计分析。回报的EQA结果仅有203家为有效数据。

表2和表3为5个批号质控物在各分组中的实验室间CV。西门子的仪器型号不同，CsA所检测的结果偏差较大，与所有仪器的检测结果的平均值（总的靶值）偏差也不同并且很大，可能与CsA在不同实验室的西门子仪器不同型号检测中的免疫交叉反应有关；Water’sHPLC的检测结果明显高于总的靶值，可能与实验室建立的方法有关；同时结合表4可以看出雅培i1000/i2000、LC-MS和Cobas系列的靶值比较接近总的靶值并且三种方法的平均不精密度在4.16%-12.8%。同时整理了各分组的EQA及格率见表5。本实验室仅将2018年3月份参加EQA的回报结果与本实验室的IQC数据结果用规范的σ度量方法结合起来，对CsA检测仪器方法进行简单分析见表1，利用公式：σ=（TEaBias）/CV，结合IQC评价标准（TEa=25%），得到本实验室的σ度量值。经计算得本实验室的σ度量值为3.17，因实验方法都是实验室自建的，没有统一标准，导致本实验室的个别数据的偏移太大，影响σ度量值，达到实验室的最低水平。但更为科学合理的性能评估还需要大量数据，这就需要临床检验中心在回报EQC的同时附录各个实验室的IQC数据。本实验室CsA检测Bias为10.96%。

 

本研究结果显示我国CsA血药浓度检测项目使用不同的仪器检测，结果明显不同，这与CsA及代谢产物在不同方法原理间存在交叉免疫反应有关，从以上结果可以看出LCMS的结果明显偏低，可能与LC-MS检测的是单体有关，不存在交叉免疫，此外，6Sigma培训技术在特异性、灵敏度及多组分同时检测上具有明显的优势，方法的灵活性更高，能产生质量更高的诊断结果，为临床诊断提供更好的服务。Water’sHPLC精密度明显低于其他仪器，但是检测结果与总体均值比较明显偏高。再结合2018年EQA各参评实验室不同仪器的及格率，Abbotti1000/i2000、LC-MS组和RocheCobas系列的及格率基本在85%以上，但是免疫方法在检测CsA血药浓度时不仅检测CsA单体，还包含部分代谢产物，存在交叉反应。
由于LC-MS技术在靶向定量分析独具优势，早期在药物生物分析领域得到成熟应用。LC-MS可以在单次运行中同时定量多个化合物，对于一些合并给药如免疫抑制剂、抗病毒药物、活性代谢物、有干扰的代谢物等情况，LC-MS特别有吸引力，推动临床实验室利用LC-MS建立药物分析方法，用于血药浓度的检测。因为本院是血液病专科医院，患者多，标本量大，需要及时监测血药浓度，方便医生及时给患者调药，所以本实验室选择了特异性高、灵敏度敏高及多组分可以同时检测的LC-MS。临床可以及时根据血药浓度调整用药剂量，做到个体化用药，使CsA在临床得到合理有效的使用。